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小鼠胎鼠海馬神經(jīng)元的原代培養(yǎng)

更新時(shí)間:2025-06-11 11:24:14       點(diǎn)擊次數(shù):111

1、取懷孕18天小鼠,采用頸椎脫臼法處死,75%乙醇全身浸泡消毒;

2、超凈臺(tái)內(nèi),無(wú)菌條件下取胚胎,放入解剖液中清洗3次;

3、分離海馬腦區(qū),解剖液沖洗3次;

4、用彈簧剪將海馬剪成1mm3大小,消化液37℃消化15-20min,每五分鐘振蕩一次;

5、去掉上清,加入種植液1終止消化,吹打10-15次,不能有氣泡,70um濾網(wǎng)過(guò)濾;

6、計(jì)數(shù);

7、按4 x 10^4 細(xì)胞/孔種入24孔板,37℃,5%CO2,95%飽和濕度的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)5h;

8、5h后更換為種植液2繼續(xù)培養(yǎng);

9、代表性結(jié)果。

 

NMDAR1標(biāo)記的神經(jīng)元胞體和突觸.jpg


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