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小鼠胃病模型構(gòu)建

簡(jiǎn)要描述:小鼠胃病模型構(gòu)建:構(gòu)建小鼠胃病模型是研究胃炎、胃潰瘍、胃癌等疾病機(jī)制及藥物干預(yù)的重要工具

  • 更新時(shí)間:2025-07-09 09:11:05
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詳細(xì)介紹

一、小鼠胃病模型構(gòu)建常見(jiàn)胃病模型類型

1. 化學(xué)誘導(dǎo)模型

  • 乙醇誘導(dǎo)急性胃黏膜損傷

    • 步驟:禁食24小時(shí)后,灌胃給予無(wú)水乙醇(0.5-1 mL/只)。

    • 特點(diǎn):6小時(shí)后可見(jiàn)胃黏膜充血、糜爛,適合研究急性胃損傷修復(fù)。

  • 吲哚m辛(NSAIDs)誘導(dǎo)胃潰瘍

    • 步驟:皮下注射吲哚m辛(10-20 mg/kg)或灌胃給藥,24-48小時(shí)后觀察。

    • 機(jī)制:抑制前列腺素合成,導(dǎo)致胃黏膜防御功能下降。

2. 幽門(mén)螺桿菌(H. pylori)感染模型

  • 菌株:SS1或臨床分離株(需適應(yīng)小鼠胃環(huán)境)。

  • 步驟

    1. 禁食4小時(shí)后,灌胃給予H. pylori懸液(10?-10? CFU/只,每周2次,連續(xù)3次)。

    2. 感染后8-12周評(píng)估(慢性胃炎、腸化生)。

  • 檢測(cè):胃組織PCR(ureA基因)、Warthin-Starry銀染色(細(xì)菌定植)、組織病理評(píng)分。

3. 手術(shù)模型

  • 醋酸誘導(dǎo)慢性胃潰瘍

    • 開(kāi)腹暴露胃,濾紙片浸漬50%醋酸貼敷胃漿膜面30秒,術(shù)后7-14天形成潰瘍。

4. 基因修飾模型

  • 轉(zhuǎn)基因小鼠:如胃酸分泌相關(guān)基因(H+/K+-ATPase β亞基敲除)。

  • 致癌模型

    • MNNG(N-甲基-N'-硝基-N-亞x基胍)誘導(dǎo)胃癌:0.1% MNNG飲水喂養(yǎng)6-12個(gè)月。


二、小鼠胃病模型構(gòu)建關(guān)鍵操作流程(以H. pylori感染為例)

  1. 預(yù)處理

    • 小鼠禁食4小時(shí),減少胃酸分泌。

  2. 感染

    • 灌胃給予H. pylori懸液(含5% NaHCO?中和胃酸,提高定植率)。

  3. 監(jiān)測(cè)

    • 體重與攝食量:每周記錄,評(píng)估全身影響。

    • 胃病理:HE染色(炎癥評(píng)分)、Giemsa染色(細(xì)菌定植)。

    • 免疫應(yīng)答:ELISA檢測(cè)血清IL-1β、TNF-α。


三、評(píng)估方法

  1. 大體觀察

    • 解剖后測(cè)量潰瘍面積(mm2)或計(jì)算潰瘍指數(shù)(0-4分)。

  2. 組織學(xué)分析

    • HE染色:評(píng)估炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)、黏膜厚度、糜爛深度。

    • 特殊染色:PAS染色(黏液層厚度)、Masson染色(纖維化)。

  3. 分子檢測(cè)

    • qPCR檢測(cè)炎癥因子(IL-6、IL-8)、胃功能標(biāo)志物(胃泌素、生z抑素)。


四、注意事項(xiàng)

  1. 動(dòng)物選擇

    • C57BL/6小鼠對(duì)H. pylori敏感;BALB/c易形成嚴(yán)重炎癥。

  2. 感染優(yōu)化

    • 使用新鮮培養(yǎng)的H. pylori(對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期),避免胃酸中和不足。

  3. 倫理終點(diǎn)

    • 體重下降>20%或嚴(yán)重出血時(shí)需人道處理。


五、模型局限性

  • 小鼠胃解剖結(jié)構(gòu)與人類差異(無(wú)主細(xì)胞、胃酸分泌模式不同)。

  • 化學(xué)誘導(dǎo)模型多為急性損傷,難以模擬慢性病變。


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